尊龙凯时推出了一种基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒,该产品具备以下显著特点:
产品特点
1. 即开即用:用户仅需提供样品DNA模板即可开始使用。
2. 高灵敏度:引物及其他组分经过优化,具有优异的灵敏度。
3. 阳性对照:提供阳性对照,有助于区分假阴性样品。
4. 优越特异性:引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的保守区域,确保不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
5. 双重检测能力:适用于定性和定量检测,定量范围至少可覆盖5个数量级。
6. 高性价比:本产品可支持50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。
7. 科研专用:本产品仅用于科研用途。
使用步骤
一、DNA提取
用户可选用不同的方法提取和纯化样品DNA,本试剂盒与市场上多数核酸提取试剂盒均兼容。
二、稀释标准曲线样品
1. 标记6个离心管,编号为7、6、5、4、3、2。
2. 使用带芯枪头向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL阳性对照(1×108拷贝/μL),并充分震荡,得到1×107拷贝/μL的标准曲线样品。
4. 依次进行稀释,以获得不同浓度的标准曲线样品,直至得到6个稀释度的标准曲线样品。
如不需制作标准曲线,可将阳性对照稀释至1×105拷贝/μL。
三、试剂配制
根据待检样品数量,准备相应数量的qPCR管,并向各管中添加指定成分(详细信息可参考说明书)。
四、添加模板
向qPCR管中分别加入2μL模板,加入顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板及阳性对照,随后离心30秒,立即进行扩增反应。
五、扩增反应
将PCR管放置于PCR扩增仪器样品槽中,进行扩增。扩增程序详见说明书。
六、结果分析
若制作标准曲线,则以阳性对照浓度的log值为横轴,Ct值为纵轴绘制标准曲线,进而推算样品DNA浓度。若未制作标准曲线,按照以下标准判定结果:
阳性对照:Ct值<30,体现明显的指数增长并呈现典型的S型曲线。阴性对照:Ct值38或无Ct值,未观察到明显增长。
样本检测结果:Ct值<35,表明检测出婴儿利什曼虫,结果为阳性;若无Ct值或值在38及以上,则标识为阴性。Ct值在35-38之间时需复检,若仍符合条件则判为阳性,否则为阴性。
运输及保存
本产品应低温运输,存放在-20℃,保存期限为一年。阳性对照需独立放置,避免污染其他试剂。
选择尊龙凯时的检测试剂盒,确保实验结果的可靠性与准确性,助力于生物医学研究的进步。