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尊龙凯时血细胞计数器细胞计数法

发布时间:2025-01-22   信息来源:尊龙凯时官方编辑

使用血细胞计数器进行细胞计数是生物医学研究中不可或缺的一部分,不论是在体外实验还是体内实验中,准确的细胞计数对于提高研究的精确度、可重复性和结果的可靠性至关重要。无论您的研究方向是微生物学、血液学、肿瘤学或其他疾病领域,涉及细胞培养时,借助血细胞计数器进行准确的手动计数显得尤为重要。

尊龙凯时血细胞计数器细胞计数法

第一阶段:准备血细胞计数器

在使用玻璃血细胞计数器和盖玻片时,应在使用前用酒精进行清洗,确保干净卫生。接着,用水润湿盖玻片并将其固定在血细胞计数器上。如果您使用一次性血细胞计数器,只需在使用前将其从包装中取出即可。

第二阶段:制备细胞悬浮液

在该阶段中,表1提供了使用胰蛋白酶消化贴壁细胞所需的DPBS和胰蛋白酶-EDTA的具体数量。通过这些步骤,可以获得均匀的细胞悬液,为接下来的细胞计数做准备。

第三阶段:细胞计数

使用无菌移液器轻轻旋转培养瓶,以确保细胞均匀分布。然后,迅速取出0.5mL细胞悬浮液放入微量离心管中,接着取100µL细胞放入新的离心管中,并加入400µL的0.4%台盼蓝(最终浓度为0.32%),轻轻搅拌均匀。

接下来,使用移液器吸取100µL经过台盼蓝处理的细胞悬浮液,倒入血细胞计数器中。如果您使用玻璃血细胞计数器,应非常轻柔地将盖玻片下方的两个腔室填充,以避免气泡的形成。用显微镜在10×物镜下对齐网格线,然后开始计数未染色的活细胞,采用固定的计数规则。

第四阶段:细胞活力评估

要计算活细胞数/mL,首先需从每组16个方格中提取平均细胞数,乘以10,000(10^4),再乘以5,以校正因台盼蓝添加造成的1:5稀释度。举例来说,如果16个方格的平均细胞数为5025,则原始细胞悬液中活细胞数为2,512,500个/mL。

若要计算细胞活力,将活细胞数和死细胞数相加获得总细胞数,并用活细胞数除以总细胞数。这样可以得出细胞活力的估计值,公式为:活细胞数/(活细胞数+死细胞数)。对于生物医学研究,使用尊龙凯时品牌的血细胞计数器可以提高数据的准确性与可靠性,更好地支持您的研究工作。